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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章
  • 2019

    7-18

    近看到不少問(wèn)有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)污染的事,正好我看到了一個(gè)有關(guān)這方面的總結(jié),很全很好很強(qiáng)大,跟大家分享下細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染情況總結(jié)如下:常見(jiàn)的污染如下:1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話(huà)有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液...

  • 2019

    7-18

    生物刺激素肯定不是所謂的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑也就是俗稱(chēng)的激素,是指人們根據(jù)植物內(nèi)源激素的原理和功能進(jìn)行人工合成的化學(xué)物質(zhì),當(dāng)然不排除有個(gè)別企業(yè)也添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。而真正意義上的生物刺激素主要是天然物質(zhì)經(jīng)過(guò)提取或是分解得到的產(chǎn)物,對(duì)植物具有生理活性的物質(zhì),甚至有些可以直接刺激植物內(nèi)源激素的形成,主要的種類(lèi)有腐植酸、氨基酸、微生物、甲殼素類(lèi)、海藻提取物以及其他的一些植物提取物,其中應(yīng)用廣泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物這三類(lèi)。很多壇友會(huì)奇怪,氨基酸、腐植酸、海藻提取物...

  • 2019

    7-16

    1、熒光免疫測(cè)定技術(shù)的概念:將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后,測(cè)定復(fù)合物中的熒光素,這種免疫技術(shù),稱(chēng)為免疫熒光素技術(shù)。2、熒光的產(chǎn)生:物質(zhì)吸收外界能量而進(jìn)入激發(fā)狀態(tài),在回復(fù)基態(tài)時(shí)多余的能量以電磁輻射的形式釋放,即發(fā)光,這種光稱(chēng)為熒光。這種物質(zhì),稱(chēng)為熒光素。由光激發(fā)所引起的熒光,為光致熒光------熒光免疫技術(shù)由化學(xué)反應(yīng)所引起的熒光,為化學(xué)熒光------化學(xué)發(fā)光技術(shù)3、熒光素的熒光特性:⑴停止供能,熒光現(xiàn)象隨即終止⑵對(duì)光的吸收和熒光的...

  • 2019

    7-16

    一般我們購(gòu)買(mǎi)商品化的primaryantibody的時(shí)候,抗體的說(shuō)明書(shū)中都會(huì)給我們一個(gè)推薦的抗體使用濃度。這個(gè)濃度在一定程度上來(lái)說(shuō),是過(guò)飽和的,可以滿(mǎn)足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)的染色需求。但是因?yàn)槭沁^(guò)飽和的濃度,這就帶來(lái)了一定程度的抗體浪費(fèi)。而過(guò)量的抗體,也會(huì)大大提高樣本的自發(fā)熒光。從另一個(gè)角度來(lái)看,因?yàn)閺S家給出的推薦濃度都是基于一個(gè)特定的樣本濃度和樣本體積,所以在一些特殊的實(shí)驗(yàn)中,比如樣本濃度或樣本體積過(guò)大的實(shí)驗(yàn),推薦的濃度就無(wú)法達(dá)到飽和滴加的要求。在這樣的前提下,推薦實(shí)驗(yàn)用戶(hù)針對(duì)自己的...

  • 2019

    7-10

    1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取...

  • 2019

    7-5

    MEM細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里常見(jiàn)和基本的實(shí)驗(yàn)了,但卻不是簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好,轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒(méi)辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)...

  • 2019

    7-3

    一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無(wú)菌試管中。2、采血后室溫靜置1小時(shí)。3、將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);-20℃下,可放置保存1個(gè)月;-70℃下,可放置保存6個(gè)月。5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶...

  • 2019

    6-14

    玻璃器皿的清洗在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中,要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過(guò)一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。1、新購(gòu)的玻璃器皿除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架...

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